現(xiàn)在實驗室所使用的酶標板大多都是用的可拆卸型的,這樣可以更加的方便試驗所需?,F(xiàn)在常用的基本都是96孔的酶標板,不同廠家做出來的酶標板雖然說在整體上看是差不多的,但是在一些小的細節(jié)方面會做的不太一樣,比如一些結(jié)構(gòu)等方面,這主要是因為要配合不同酶標儀。那么酶標板怎么用呢?在使用的時候要注意什么?
酶標板的使用方式:
1、加樣品:將標本稀釋液加到包被板內(nèi),將需要檢測的血清用PBS或生理鹽水按照1:20的比例稀釋后取10ul加入到酶標板的反應(yīng)孔內(nèi)。
2、加對照:加入陰性對照3孔,陽性對照1孔,還有100ul的對照血清。
3、進行溫育:將反應(yīng)板震蕩,使樣品充分的混勻,置于37℃的溫箱或者水浴反應(yīng)20分鐘的時間。
4、洗板:用蒸餾水將洗滌液15ml稀釋至300ml的體積。手洗的時候應(yīng)該將反應(yīng)板孔內(nèi)的容物傾出,將洗滌液注滿反應(yīng)孔的位置,然后放置30秒鐘后用力甩去,這樣的動作重復5次后開始拍干。機洗需要進行5次,每孔注入洗滌液200ul或者可以注滿,然后停留30秒鐘后吸盡拍干。
5、加酶標工作液:在每孔內(nèi)加入100ul的酶標工作液,放置到37℃的溫箱中,反應(yīng)20分鐘后洗板5次,洗板的操作和上述步驟4是相同的。
6、這是反應(yīng)的后一步,就是顯色和終止反應(yīng):將底物50ul加到反應(yīng)孔內(nèi),37℃條件下避光顯色10分鐘的時間。在每孔內(nèi)加入終止液50ul混勻用以終止反應(yīng)。
酶標板的使用需要在無菌的條件下進行。在酶標板使用之前和之后都要認真的進行消毒和清洗,但是需要注意的是有的酶標板在消毒之前需要認真的閱讀說明書,看是否可以進行高溫消毒。