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良好的移液操作規(guī)范可以直接影響到實(shí)驗(yàn)的成功和可重現(xiàn)性

更新時(shí)間:2021-05-06瀏覽:1672次

  良好的移液操作規(guī)范可以直接影響到實(shí)驗(yàn)的成功和可重現(xiàn)性
  我們到底如何才能夠獲得更好的移液結(jié)果,如何在實(shí)驗(yàn)中減少操作時(shí)產(chǎn)生的誤差呢?下面用數(shù)據(jù)告訴你如何提高20%的移液準(zhǔn)確性。
  1  選擇合適的量程,可提高1%的移液準(zhǔn)確性
  對(duì)特定的一支移液器,其移液的準(zhǔn)確性隨移液量的降低而降低。因此在10%-100%量程范圍內(nèi)可以操作,更佳量程范圍是35%-100%。不要用大量程的移液器移取小體積的液體,否則移液準(zhǔn)確性將下降1%。
  2  正確的量程設(shè)定,可提高0.5%移液準(zhǔn)確性
  當(dāng)把大量程調(diào)為小量程(如從200ul調(diào)到100ul)時(shí),直接調(diào)節(jié)到位即可;當(dāng)把小量程調(diào)為大量程時(shí),需先超過(guò)所需量程1/3到1/2圈,然后再回調(diào)到所需的量程。這樣做是為了消除移液器本身的機(jī)械誤差,提高0.5%的移液準(zhǔn)確性。
  3  潤(rùn)洗吸頭,可提高0.5%的移液準(zhǔn)確性
  在正式移液前,先用吸頭吸取待轉(zhuǎn)移的液體,然后再把它作為廢液排掉。潤(rùn)洗吸頭的目的是減少吸頭內(nèi)壁吸附力對(duì)準(zhǔn)確性的影響,可提高0.5%的移液準(zhǔn)確性
  4  正確的吸液速度,可提高5%的移液準(zhǔn)確性
  吸液速度:在吸液過(guò)程中,須慢慢降低拇指的下壓力,使液體在吸頭內(nèi)均勻且緩慢的上升;對(duì)于大量程和高粘度移液,在吸液時(shí)松開(kāi)拇指后,須使吸頭在液體內(nèi)停留3-5秒后才能移出。不正確的吸液速度會(huì)導(dǎo)致至少5%的準(zhǔn)確性下降!
  5  正確的吸液角度,可提高0.5%的準(zhǔn)確性
  (微量程移液器可達(dá)2.5%)
  在移液的過(guò)程中須一直保持移液器在豎直狀態(tài),更大傾角不超過(guò)20°(一般有傾角會(huì)導(dǎo)致實(shí)際吸液量偏大)。
  6  正確的吸液深度,可提高1%準(zhǔn)確性
  (微量程移液器可達(dá)5%)
  在吸液過(guò)程中,如果吸頭浸沒(méi)過(guò)多,額外增大的壓力會(huì)使多余的液體被移液器吸入,并且過(guò)分浸入會(huì)導(dǎo)致外壁殘留液體增多從而造成移液量值偏高;如果吸頭浸沒(méi)高度不足,空氣將會(huì)隨液體吸入吸頭內(nèi),從而產(chǎn)生氣泡造成量值偏低;
  7  良好的分液技巧,可提高1%的準(zhǔn)確性
  我們?cè)诜忠旱臅r(shí)候,可以將吸頭先接觸容器內(nèi)壁,使其沿容器內(nèi)壁向上滑動(dòng),避免液體粘在槍頭上。另外,液面上分液,液面分液和液面下分液三種方法同樣也適用于非粘性溶液。液面下分液主要用于小量程移液器的分液,注意一定要在吸頭從液體中移出后才能松開(kāi)拇指。
  8  在恒定溫度下移液,可提高5%的準(zhǔn)確性
  經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的移液,您手上的溫度會(huì)使移液器變熱,移液器也會(huì)熱脹冷縮啦。它內(nèi)部的空氣一膨脹,吸液量增加,結(jié)果就會(huì)不準(zhǔn)確。理想的移液溫度為21.5℃(±1℃)。您的儀器和樣品的溫度應(yīng)與工作的室溫相同,如果可以的話建議使它們先平衡20分鐘。在恒定溫度下移液器又可以將結(jié)果改善高達(dá)5%啦!
  上面的百分?jǐn)?shù)加起來(lái)達(dá)到20.5%,平時(shí)不注意的細(xì)節(jié)對(duì)移液影響居然這么大,小伙伴們,你們還能淡定嗎?

 

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